故事的主要角色是史酷比杜，一只呆萌可爱的笨狗，以及四位人类伙伴，他们一起调查各种神秘的超自然案件。影片不仅讲述了他们的冒险经历，还揭示了史酷比与夏吉这一不可分割的友情如何诞生。此外，观众还将了解到，他们如何与少年侦探弗雷德、维尔玛和达芙妮一起组建了著名的神秘公司，成为世界上最杰出的谜案解决专家

虽然神秘公司已经解决了数百起谜案，经历了无数次冒险，但史酷比和他的伙伴们却发现，他们正面临着前所未有的挑战：一个将危险的幽灵狗塞伯勒斯释放到世界上的阴谋。他们必须拼尽全力，阻止这场全球性的大灾难。在追寻真相的过程中，他们也逐渐揭示了史酷比背后的秘密身世，以及他超乎想象的神秘命运。